Phương Pháp Nuôi Cấy Vi Sinh Vật

Điều đặc trưng vào quá trình nuôi cấy vi khuẩn là tránh ko gửi thêm vi trùng nước ngoài lan truyền vào môi trường nuôi cấy. Do vậy, kế bên các thao tác làm việc luôn đề xuất được thực hiện vào ĐK vô trùng hoàn hảo, phần lớn nguyên tố trường đoản cú môi trường, hình thức chứa, điều khoản nuôi ghép cho các trang bị dụng cần thiết phần đông nên được tiệt trùng trước lúc áp dụng.

Bạn đang xem: Phương pháp nuôi cấy vi sinh vật

Phương thơm pháp phân lập, nuôi cấy vi khuẩn là gì?

Phân lập là khâu đặc biệt quan trọng vào quy trình nghiên cứu nuôi ghép vi khuẩn.

Mục đích của phương thức phân lập là bóc tách riêng những vi khuẩn từ quần thể thuở đầu chế tạo ra thành các clon thanh khiết để khảo sát cùng định loại. lúc vi khuẩn vững mạnh cùng trở nên tân tiến trên mặt phẳng môi trường xung quanh rắn sẽ tạo nên phần đông trùng lạc, hình dáng của những khuẩn lạc vẫn mang tính đặc thù của từng loại vi trùng. Việc trình bày chính xác những khuẩn lạc sẽ tách rời hoàn toàn có thể đóng góp phần cực kỳ đặc trưng trong Việc chẩn đân oán vi khuẩn học. Các bên phân tích vi khuẩn học đã tiêu chuẩn hoá có ý nghĩa Khi diễn tả hình dáng, độ dài cùng bờ, rìa của khuẩn lạc.

Điều quan trọng biện pháp nuôi vi khuẩn là tách ko đưa thêm vi sinc vật dụng ngoại lan truyền vào môi trường nuôi ghép. Do vậy, không tính những thao tác luôn luôn cần được triển khai trong ĐK vô trùng tuyệt đối, đa số nguyên tố trường đoản cú môi trường, cơ chế đựng, chế độ nuôi cấy mang đến các thiết bị dụng quan trọng gần như yêu cầu được tiệt trùng trước lúc áp dụng.

*

Điều đặc biệt quan trọng bí quyết nuôi vi khuẩn là rời không gửi thêm vi sinch đồ gia dụng nước ngoài lây lan vào môi trường nuôi cấy

Các dạng mẫu mang đến nuôi cấy với dụng cụ cấy

Dạng mẫu mã nuôi cấy

Dạng dịch mẫu hướng đẫn nuôi cấy vi khuẩn đã được đồng điệu, dịch nuôi ghép hoặc môi trường xung quanh lỏng cất chủng vi sinch đồ cần so với.

Dạng bên trên mặt phẳng của môi trường rắn cất thạch (từ 1,5-2%) trong ống thạch nghiêng tuyệt vào đĩa petri.

Dạng mẫu nằm sâu vào môi trường thiên nhiên rắn vào ống nghiệm thạch sâu chứa thạch mềm (0,5-0,7%).

Dụng nỗ lực cấy

Que cấy thẳng: Que cấy sắt kẽm kim loại bao gồm đầu nhọn, dùng để làm ghép vi khuẩn tất cả chế tạo trùng ty.

Que cấy móc: Đây là que ghép tất cả đầu vuông góc, dùng để làm ghép vi trùng gồm tạo trùng ty.

Que cấy vòng: Là que ghép sắt kẽm kim loại đầu gồm vòng tròn, sử dụng cấy chủng trường đoản cú môi trường thiên nhiên rắn hoặc lỏng lên môi trường thiên nhiên rắn, lỏng.

Que ghép trang: Là que bởi sắt kẽm kim loại xuất xắc thủy tinh trong, đầu hình tam giác, dùng để làm giàn trải vi trùng bên trên mặt phẳng thạch rắn.

Ống hút tdiệt tinh: Dùng để đưa một lượng vi trùng quan trọng lên mặt phẳng môi trường xung quanh rắn hoặc vào môi trường lỏng.

Đầu tăm bông vô trùng: Dùng để cấy tương tự từ môi trường thiên nhiên lỏng lên mặt phẳng của môi trường thiên nhiên rắn.

Các phương pháp phân lập, nuôi cấy vi khuẩn

*

Có phần đông phương pháp phân lập, nuôi cấy vi trùng nào?

Kỹ thuật cấy ria bên trên đĩa petri

Dùng que cấy vòng thao tác vô trùng nhúng vào dịch mẫu để có những vi trùng ao ước phân lập.

Ria những mặt đường bên trên đĩa petri tất cả cất môi trường thiên nhiên thạch tương thích. Sau mỗi mặt đường ria liên tiếp, hãy đốt tiệt trùng que cấy cùng làm nguội trước khi tiến hành thao tác làm việc tiếp theo.

Lật ngược đĩa cùng ủ làm việc ánh nắng mặt trời, thời hạn phù hợp ở bên trong gầm tủ nóng.

Kỹ thuật ghép trang

Dùng pipet chuyển 0,1ml dịch canh khuẩn lên ở trên mặt phẳng môi trường xung quanh thạch vào đĩa petri.

Nhúng đầu tkhô giòn gạt vào đụng và hơ qua ngọn lửa nhằm khử trùng. Sau đó, để đầu thanh khô gạt nguội trong không khí vô trùng của ngọn gàng lửa.

Mở đĩa petri, dìu dịu tkhô hanh gạt lên bề mặt thạch của đĩa petri. Dùng đầu thanh gạt trải hồ hết dịch vi trùng lên ở trên mặt phẳng thạch. Quá trình tiến hành hãy xoay đĩa một vài lần, những lần khoảng nửa chu vi đĩa nhằm chế tạo điều kiện đến thanh khô gạt trải dịch vi trùng hồ hết mọi bề mặt môi trường.

Lật ngược đĩa với ủ sinh sống nhiệt độ, thời gian tương thích ở bên trong gầm tủ ổn định nhiệt.

Xem thêm: Thích Mê Với 10 Bộ Phim Hay Và Đình Đám Nhất Của Thành Long, Top 15++ Phim Hay Nhất Của Thành Long

Cấy như thể trường đoản cú môi trường xung quanh lỏng lịch sự ống thử cất môi trường xung quanh lỏng

Đốt lạnh đỏ đầu que ghép trong ngọn gàng lửa rồi hơ dịu phần cán, rồi nắm trực tiếp đứng que cấy mang đến que cấy nóng đông đảo.

Tay trái cố kỉnh ống nghiệm luân phiên nhẹ, tay phải gắng que ghép. Dùng ngón út của tay phải để mngơi nghỉ nút ít bông. Sau Khi mở nút bông, xoay miệng ống thử qua ngọn lửa.

Đưa que cấy đang vô trùng vào phía bên trong ống thử cùng có tác dụng nguội que cấy (áp đầu que cấy vào thành ống đến nguội). Nhúng que ghép vào môi trường thiên nhiên lỏng, rút ít thẳng que ghép ra không để bám dính thành và mồm ống nhằm thu sinh khối. Hơ nóng mồm ống thử cùng bít nút bông rồi đặt ống thử vào giá bán đỡ.

Đầu que nuôi cấy vi khuẩn được duy trì sinh hoạt vùng không gian vô trùng sát ngọn đèn. Dùng tay trái đem ống thử đựng môi trường new rồi mở nút bông cùng khử trùng mồm ống thử. Tiếp kia, chuyển đầu que cấy vào phía bên trong môi trường.

Nhúng cùng khuấy thanh thanh que cấy trong dịch môi trường xung quanh nhằm tách sinc kăn năn ra khỏi đầu que ghép.

Rút trực tiếp đầu que ghép ra. Khử trùng miệng ống nghiệm với bịt nút ít bông.

Khử trùng que cấy tức thì sau khi cấy ngừng.

Cấy giống tự môi trường lỏng thanh lịch ống thạch nghiêng

Pmùi hương pháp này triển khai tương tự như trên, nhưng lại gồm một số trong những khác hoàn toàn sau:

Cấy như thể lên ở trên mặt phẳng thạch nghiêng bằng phương pháp đặt vơi đầu que cấy lên bề mặt môi trường sống đáy ống.

Sau kia, ghép theo hình chữ đưa ra tự lòng ống nghiệm lên tới đầu trên mặt thạch nghiêng.

Cấy như là tự môi trường lỏng bởi pipet đầu rời

Pipet đầu tách chất nhận được thao tác đúng chuẩn với rất nhiều diện tích bé dại. Trong thao tác vô trùng, pipet đầu rời rất hữu dụng do nó được cho phép cấy đưa dễ dàng dịch vi khuẩn lên mặt phẳng môi trường rắn vào đĩa petri để tạo nên trùng lạc rời hoặc vào ống thử hoặc bình cất môi trường thiên nhiên lỏng nhằm nuôi tăng sinh. Trước Khi áp dụng, kiểm định viên cần biết các thưởng thức cơ bản trong phương pháp nuôi vi khuẩn cùng với pipet đầu rời như sau:

*

Pipet đầu rời cho phép thao tác làm việc đúng chuẩn cùng với mọi không gian nhỏ

Mỗi pipet đầu rời đều phải sở hữu số lượng giới hạn diện tích thao tác làm việc cho phép khăng khăng kia là: 0,1 ml, 1- 20ml, 20- 20ml, 0,2- 1 ml, 1-5 ml, 1- 10 ml. Nên chọn pipet đầu tránh cùng với số lượng giới hạn khoảng trống phù hợp mang lại phạm vi làm việc.

Pipet đầu tránh bao gồm nhị nấc: Nấc 1 tương đương cùng với thể tích được chọn sử dụng lúc hút ít dung dịch; nấc 2 (quá thừa mức 1) dùng để làm bơm hỗn hợp thoát ra khỏi đầu tip của pipet đầu rời.

Lúc thực hiện pipet đầu rời nhằm ghép chuyển dịch giống thì rất cần được triển khai vào không khí vô trùng của ngọn gàng lửa trong tủ cấy.

Tay yêu cầu rứa pipet đầu tránh, tay trái mlàm việc vỏ hộp đựng đầu tip vô trùng. Sau kia, cắm đầu pipet vào đầu tip.

Dùng tay trái duy trì ống nghiệm và bình chứa dịch giống như vi sinc thứ. Dùng ngón út ít, áp út ít của tay buộc phải đang nắm giữ pipet để kẹp giữ lại cùng mngơi nghỉ nút ít bông, kế tiếp hơ nóng diệt trùng miệng ống thử hoặc bình đựng.

Đưa đầu tip vô trùng vào phía bên trong dịch tương đương rồi hút rước thể tích cần thiết. Sau kia, rút ít đầu tip ra khỏi mồm bình cất, tiệt trùng miệng bình đựng cùng che bằng nút ít bông đang được giữ sống ngón út với áp út tay nên.

Đầu tip có cất vi sinch thứ rất cần được giữ nghỉ ngơi vùng không khí vô trùng ngay sát ngọn đèn.

Dùng tay trái rước ống nghiệm hoặc bình đựng môi trường thiên nhiên mới, cần sử dụng ngón út ít với áp út kẹp cùng mở nút ít bông, vô trùng mồm bình chứa.

Đưa đầu tip vào bên phía trong môi trường thiên nhiên rồi bơm dịch tương tự vào môi trường xung quanh. Sau kia, rút đầu tip ra khỏi mồm bình đựng, tiệt trùng mồm bình với đậy nút bông.

Đầu pipet đầu tránh cùng đầu tip được sản xuất bằng polymer rất cần phải sát trùng tốt tuyên chiến và cạnh tranh pipet cùng đầu tip bằng ngọn gàng lửa.

Để bảo đảm sự cách tân và phát triển của vi khuẩn, sau khi nuôi ghép vi khuẩn ngừng cần quyên tâm mang lại các điều kiện môi trường thiên nhiên nuôi vi khuẩn như: Nhiệt độ tối ưu cho việc phát triển của từng loại vi trùng cùng bảo trì định hình nhiệt độ; nhiệt độ trong quá trình nuôi ủ buộc phải đảm bảo đầy đủ lượng nước; khí oxy đối với vi sinh vật hiếu khí, lớp môi trường xung quanh nuôi ghép bao gồm độ dày vừa phải kê oxy không gian có thể thnóng vào.